植物激素对大花蕙兰组培快繁的影响摘要:在大花蕙兰组培快繁过程中 , 植物激素对原球茎的诱导、增殖及幼苗的分化有显著影响 。 细胞分裂素6-BA和生长素N从最佳配比对大花蕙兰组织培养很重要 , 尤其是细胞分裂素影响较大 。
关键词:大花蕙兰;组织培养;植物激素
大花蕙兰(Cymbidium)是兰科兰属中一部分大花附生种及其杂交种的统称 , 属复茎地生兰或半附生兰 , 原产地在喜马拉雅山脉及东南亚高山上 , 是世界五大重要商品兰花之一 , 近几年在我国花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉 , 具有极高的观赏价值 , 株型高大雄伟 , 花大而多 , 色彩鲜艳 。 由于大花蕙兰多为杂交种 , 种子繁殖无法保持其品质特性 , 其结实率也相当低 , 分株能力弱 , 因而繁殖系数低 , 繁殖速度慢 , 远远不能满足商品化生产的需求 , 而采用组织培养方法进行原球茎增殖可以达到工厂化生产目的 。 试验研究植物激素对大花蕙兰组织培养快速繁殖的影响 , 并成功地建立了快繁体系 , 可以用于工厂化育苗 。
1材料与方法
1.1材料
大花蕙兰采自河南农业大学兰花园中FN4品种 , 切取健康饱满10~15cm长的芽 , 剥去外部叶片直到5mm大小 , 消毒处理后作为外植体诱导材料 。
1.2植物激素对原球茎诱导的影响
以MS为基本培养基 , 6-BA设0.5、1.0、1.5、2.0mg/L(单位下同)4个浓度水平 , NAA浓度为0.2mg/L , 培养基均附加香蕉汁100g/L , 活性炭0.5g/L , 每处理接10瓶 , 每瓶接1个茎尖 , 培养30d后 , 调查原球茎诱导率 。
1.3植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
将诱导的原球茎分别接种于下列不同培养基中:①MS+6-BA1.0+NAA0.1;②MS+6-BA1.0+NAA0.5;③MS+6-BA1.5+NAA0.1;④MS+6-BAl.5+NAA0.5;⑤MS+6-BA2.0+NAA0.1;⑥MS+6-BA2.0+NAA0.5 , 以上培养基均加入香蕉汁130g/L , 活性炭1.0g/L 。 每瓶接种10个原球茎 , 每处理10瓶 , 培养40d后 , 调查增殖系数及成苗数 。
1.4植物激素对幼苗生根的影响
将原球茎增殖及幼苗分化培养中高于2cm的幼苗切出 , 转接到下列生根壮苗培养中:①1/2MS+6-BA0.1+NAA0.5;②1/2MS+6-BA0.3+NAA0.5;③1/2MS+6-BA0.5+NAA0.5;④1/2MS+6-BA1.0+NAA0.5 , 每种培养基均附加香蕉汁150g/L , 活性炭1.5g/L 。 每瓶接20个幼苗 , 每处理10瓶 , 30d后统计生根率及生长情况 。 以上MS培养基中白糖浓度为30g/L , 1/2MS培养中的白糖浓度为20g/L , 琼脂为7g/L , pH值为5.3 。 培养条件:温度为24~26℃ , 光照强度为1000~1800lx , 光照时间12~14h/d 。
2结果与分析
2.1植物激素配比对原球茎诱导的影响
从表l可以看出 , 随着6-BA浓度的增大 , 原球茎诱导率逐步增高 , 在6-BA1.5时达到最大 , 6-BA浓度再增大 , 原球茎诱导率下降 , 生长中发现细胞分裂素低浓度形成原球茎慢 , 并且诱导出原球茎数目少 , 高浓度形成愈伤多 , 原球茎少 。 在培养基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉汁100g/L+活性炭0.5g/L原球茎诱导率达到90% , 并且每个茎尖分化出4~5个原球茎 。
2.2植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
大花蕙兰原球茎在增殖的过程中有幼苗的分化 , 长时间不转接 , 会形成很多苗 , 因此增殖与幼苗分化同时进行 。 合理的激素配比会达到理想增殖与成苗 。 从表2可以看出 , 随着细胞分裂素的增大 , 原球茎增殖系数也增大 , 但幼苗分化数却随着降低 , 综合考虑增殖与成苗 , 培养基④最好 , 因此最佳增殖及幼苗分化培养基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁130g/L+活性炭1.0g/L 。
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