胚轴接种(一)实践目的
在上次实践基础上进一步学习愈伤组织培养的胚轴切割转接技术 , 加深对愈伤组织的理解 。
(二)实践地点和时间
植物组培室、建议4学时
(三)实践用具与材料
超净工作台、手术剪、枪状镊、解剖刀或刀片、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、记号笔 。 无菌播种已萌发青豆、无菌播种已萌发豌豆、大量元素、微量元素、维生素、铁盐、ba、2,4—d等母液 。
(四)实践步骤
1、制备培养基
为试验观察生长物质对愈伤组织的影响 , 加深理解 , 可做对比试验 , 制备三种培养基
配方1ms+0.1ml/lba+0.5ml/l2.4—d
配方2ms+0.5ml/lba+0.1ml/l2.4—d
配方3ms
2、下胚轴的切割转接
(1)进行超净工作台开启紫外灯、风机 , 换鞋、穿工作服、清洁双手等常规操作 。 检查酒精灯、酒精瓶是否该加酒精 。
(2)将上周无菌播种成活 , 已经萌芽的种子放入超净工作台 , 仔细观察种子 , 把污染的淘汰掉 。
(3)灼烧镊子和解剖刀刀片 , 冷却 , 注意不能伤手 。
(4)用工具将萌发种子放入培养皿内滤纸上 , 看清楚的胚轴位置 , 用镊子和解剖刀刀片等器械除去子叶和胚根 , 切割胚轴成5mm左右切段 。
(5)将切割下来的胚轴移入新培养基内 , 做好标记 , 三种配方分别移入标记 , 放入培养室培养 。
3、清洁整理
按常规清洁整理超净工作台和实验室 , 注意超净工作台不能用酒精擦拭 , 地面可用洗衣粉拖地 , 接种室可进行甲醛加高锰酸钾熏蒸 , 为以后的实验作准备 。
(五)实训作业
写出本次实践报告 , 并写出自己的实践效果和体会
(六)评分标准
胚轴识别清楚 , 胚轴切割转接操作正确 , 愈伤组织分化成活高 , 污染小 。
【【花卉大全】胚轴接种】
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