电泳图谱分析 构建基因组文库的一般步骤
基因组文库构建的方法与过程分别是什么?方法:限制性酶切法、机械剪切法 过程:
1.载体DNA片段的制备 .
2. 供体DNA片段的制备 细胞中总DNA分离纯化 机械剪切法 分离特定大小DNA片段 限制性酶切 分离特定大小DNA片段
3. 供体与载体DNA连接
4. 重组DNA分子的转移和基因组文库的扩增 利用转化或感染方法将连接DNA分子导入宿主细胞 , 让其自主复制 , 重组DNA分子被扩增(重组子比率可能发生变化)
5. 基因组文库质量的评价 1)文库规模----随机挑取一些转化子或重组子 , 提取质粒DNA , 电泳测定插入片段大小 , 然后根据上述公式计算文库大小 。2)重组频率----频率越高 , 质量越高 , 可大大减轻后续筛选基因工作量 。
基因组文库构建的方法与过程分别是什么?首先获取供体细胞中的DNA---用限制酶切割成许多DNA片段---并将其插入载体---并导入受体菌群(基因组文库)外源DNA扩增 , 产生特定性状分离目的基因 。
怎样构建基因组文库.基因文库的大小如何确定?怎样构建基因组文库.基因文库的大小如何确定
【电泳图谱分析 构建基因组文库的一般步骤】基因文库技术分离目的基因 所谓文库(1ibrary)是指一种全体的集合.基因文库(gene library)则是指某一生物类型全部基因的集合.这种集合是以重组体形式出现.某生物DNA片段群体与载体分子重组 , 重组后转化宿主细胞 ,
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