多聚赖氨酸包被的原理是什么?聚赖氨酸包被细胞的原理是聚阳离子聚赖氨酸分子强烈吸附到玻璃表面 , 留下阳离子位点与细胞表面的阴离子位点结合 。聚赖氨酸是阳离子聚合物 。
在生理条件下 , 聚赖氨酸分子上的胺基被质子化 。它的阳离子性质使其成为带负电荷生物分子粘附和细胞粘附的理想涂层基质 。已知电池表面带负电 。因此 , 聚赖氨酸涂层被广泛用于细胞培养中细胞的粘附 。
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要不要将聚赖氨酸溶解在dd-水中进行涂布?在dd水中涂布聚赖氨酸的方法简单 , 但涂布效率低 。滴水的pH值是酸性的 , 通常低于pH6 。溶解聚赖氨酸后 , ph值进一步降低到3 , 这对于聚赖氨酸的涂布来说是不理想的 。
解决办法 。在硼酸缓冲液中使用高pH值的聚赖氨酸包衣 , 如pH值8.5 , 可增强聚赖氨酸对细胞培养表面的吸附 。
关键:细胞培养前必须彻底冲洗掉盖玻片上的硼酸缓冲液残留物 。
我的培养皿/培养板/盖玻片上需要多少聚赖氨酸?【多聚赖氨酸包被的原理是什么?】所需的聚赖氨酸的最小量是7.5ug/cm2的培养皿或盖玻片表面积 。例如 , 涂抹100片直径为18mm的盖玻片 , 100片盖玻片的总表面积为0.9x0.9x3.1416 x2x100 = 510cm2 。所需的聚赖氨酸为510x7.5ug=3825ug=3.825mg 。
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