【花卉】花卉组织培养技术( 二 )


配制培养基前要准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸和等玻璃器皿 , 预先称好药品 。 配制时先将琼脂溶化 , 再加入在水中深解的各种营养元素和蔗糖 , 然后用氢氧化钠或盐酸调整培养基的pH , 一般掌握在5.7左右 。 以后可分注到养瓶中 , 盖好瓶盖 。 培养基配好要经高压灭菌 。 冷却后放到培养室预培养3天 , 如没有杂菌污染 , 才可进行花卉材料的接种 。
4、花卉组织培养的过程
花卉植物组织培养即无菌培养 , 也就是要求培养的材料不带有杂菌 。 从田间或温室等地切取花卉材料时 , 应选择健壮无病虫母株 , 取幼嫩、分生能力强的部位 , 以利生长 。
取来的材料虽经选择 , 外部总还有不少杂菌 。 为此 , 接种前应进行表面灭菌 。 通常先用自来水冲洗十几分钟 , 有泥的应刷去 。 冲洗干净后 , 用70%的酒精浸泡10-15秒钟消毒 。 接着用无菌水(经高压灭菌的蒸馏水)冲洗两次 , 再用10%的漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒 , 最后用无菌水冲洗3-4次 。 带有茸毛不易湿润消毒的材料可加些洗衣粉 。 上述操作皆应在接种箱或超净工作台等无菌环境条件进行 。 经过表面灭菌的材料 , 用无菌滤纸将水吸掉 。 再用解剖刀切取所需部位 , 通常几毫米大小 , 培育无病毒苗则应在1毫米以下 , 然后用解剖针或枪式镊子将材料接种到培养瓶上培养 。 工具用完即应在95%酒精中蘸一下 , 或用火焰消毒法消毒 , 避免工具带菌造成交叉污染 。 操作时应穿工作服、戴工作帽 , 事先洗净手 , 后再用酒精棉擦试一遍 。
5、花卉组织培养材料的培养和移植
花卉材料接种后放到培养室培养 。 培养室是花卉材料培养生长的场所 , 一般几到十几平方米皆可 。 高度约2米左右 , 空间小 , 可节省控温能源 。 培养材料放在培养架上培养 。 培养架可有木材或金属制成 , 有4-5层 , 每层高40-50厘米 , 日光灯装在上方 。 架长1.2米左右 , 与40瓦日光灯长一致 , 宽80-90厘米 。 每一层可装两支日光灯 , 这样培养时的照度约为3000勒克斯 。 培养室的温度大多采取昼夜恒温培养 , 保持在25℃±2℃ , 也有采取昼夜变温培养的 , 夜晚温度可低些 , 这应根据花卉生长需
要而定 。 每天日光灯照明12-16小时 。
花卉试管苗由于人工提供各方面优越条件 , 一般生长发育好 , 根系也多 , 可往往由于没掌握其特性 , 造成移栽时成活率不高 。 这是因为试管苗在瓶中湿度很高的条件下培养 , 人为提供蔗糖等碳源 , 花卉材料是处一起异养生活状态 , 可以说比温室生长的花卉还要娇嫩得多 。 而突然从瓶中移到土壤让其过自养生活 , 往往由于变化太剧烈而造成损伤甚至死亡 。 为此 , 花卉试管苗开始移出时 , 仍应罩上玻璃瓶 , 或盖上薄膜袋(上开几个小孔) , 1周后去掉 。 有喷雾条件则更理想 。 开始7-10天要遮荫 , 以后逐渐见阳光 。 移植基质以沙与蛭石各半为好 , 要排水、通风好 , 隔一天浇一次营养液 。 这样逐步锻炼 , 让其适应环境 。 2-3周后经驯化锻炼苗即可移至培养土中栽植 。

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